Flavonoide de Tithonia diversifolia afeta cutícula de Spodoptera litura

A 6-metoxiluteolina, flavonoide isolado da planta Tithonia diversifolia, reduziu a atividade da tirosinase, diminuiu o teor de melanina e causou alterações estruturais na cutícula de larvas de Spodoptera litura. O resultado, obtido em por pesquisadores chineses, indica potencial do composto como base para inseticidas botânicos com ação sobre a melanização em lepidópteros-praga.

Os cientistas avaliaram larvas entre o terceiro e o sexto ínstar. O trabalho usou concentrações de 1,625 a 100 microgramas por mililitro de 6-metoxiluteolina. As larvas receberam dieta artificial tratada por três dias, a partir do segundo ínstar. Depois, seguiram em dieta sem o composto.

A pesquisa teve como alvo a via de melanização. Essa rota participa da esclerotização da cutícula, da cicatrização e da defesa imune em insetos. A tirosinase catalisa etapas ligadas à oxidação de substratos derivados da tirosina. Esse processo leva à deposição de melanina no tegumento.

Atividade da tirosinase

A atividade da tirosinase sofreu alteração em todos os ínstares avaliados. No terceiro ínstar, o grupo controle apresentou a maior atividade, próxima de 125 unidades por miligrama de proteína. A menor atividade ocorreu na concentração de 100 microgramas por mililitro. No quarto ínstar, a atividade basal do controle ficou menor do que no terceiro ínstar. A concentração de 1,625 micrograma por mililitro reduziu a atividade de forma significativa. No quinto e no sexto ínstares, os autores registraram diferenças entre tratamentos, com variação dependente da concentração.

O teor de melanina no tegumento também caiu após o tratamento. O efeito apareceu com maior intensidade no terceiro ínstar. Nessa fase, o teor passou de cerca de 2,2 microgramas por miligrama de tecido, em 3,125 microgramas por mililitro, para cerca de 0,4 micrograma por miligrama em 100 microgramas por mililitro. A redução superou cinco vezes. No quinto ínstar, o controle apresentou o maior teor, próximo de 6,2 microgramas por miligrama, e houve reduções significativas em 6,25 e 25 microgramas por mililitro.

Imagens macroscópicas

As imagens macroscópicas reforçaram os dados bioquímicos. Larvas do controle apresentaram pigmentação escura e faixas dorsais definidas. Larvas tratadas mostraram clareamento progressivo do corpo. O efeito visual apareceu a partir de 3,125 microgramas por mililitro. Nas concentrações de 25 a 50 microgramas por mililitro, o tegumento assumiu coloração mais pálida, em comparação ao controle.

Análise histológica

A análise histológica apontou perda de grânulos de melanina e desorganização da cutícula. Os autores prepararam cortes de larvas do quarto e do quinto ínstares, com inclusão em parafina e coloração por hematoxilina e eosina. No quarto ínstar, o controle apresentou cutícula contínua e deposição densa de grânulos de melanina na superfície externa. Em 12,5 microgramas por mililitro, a estrutura ficou mais frouxa e com menor densidade de grânulos. Em 100 microgramas por mililitro, a camada cuticular ficou mais fina e desorganizada.

No quinto ínstar, o controle manteve uma camada pigmentada e bem definida. Em 6,25 microgramas por mililitro, houve afrouxamento da cutícula e redução da deposição de melanina. Em 25 microgramas por mililitro, os autores observaram fragmentação estrutural e distribuição irregular dos grânulos.

A mensuração da espessura confirmou o efeito no quarto ínstar. A cutícula do controle mediu 4,70 ± 0,13 micrômetros. Todos os tratamentos com 6-metoxiluteolina apresentaram espessura menor. A maior redução ocorreu em 12,5 microgramas por mililitro, com 2,53 ± 0,13 micrômetros. O valor representa queda de 46% em relação ao controle.

Mais informações em doi.org/10.3390/insects17060535